Duplicación del ADN
Estructura básica del ADN las cadenas se unen a través de lasa bases que son complementarias, Citocina con Guanina: a través de tres puentes de hidrógeno, y Adenina con Timina a través de dos. Fuente: https://www.diegocalvo.es/definicion-de-acido-nucleico/arn-arn/
La replicación del ADN es el proceso por el cual se obtienen copias o réplicas idénticas de una molécula de ADN. La replicación es fundamental para la transferencia de la información genética de una generación a la siguiente y, por ende, es la base de la herencia.
El mecanismo consiste esencialmente en la separación de las dos hebras de la doble hélice, las cuales sirven de molde para la posterior síntesis de cadenas complementarias a cada una de ellas, que llevará por nombre ARNm. El resultado final son dos moléculas idénticas a la original.
Este tipo de replicación se denomina semi-conservativa debido a que cada una de las dos moléculas resultantes de la duplicación presenta una cadena procedente de la molécula «madre» y otra recién sintetizada
Como podemos observar en las imágenes, para que el ADN se duplique ambas cadenas son separadas por un enzima llamada Helicasa
La enzima que sintetiza ADN uniendo a los nucleótidos complementarios a la cadena molde, es la ADN polimerasa
Una contra que tiene esta enzima es que no puede iniciar la síntesis, porque no puede unir dos nucleótidos libres, por eso necesita que haya una pequeña fracción ya sintetizada conocida como primer o cebador. Esto lo sintetiza la ARN polimerasa, que hace un pequeño fragmento de ARN. Ese fragmento lo hace la ARN polimerasa o primasa. Luego es removido y reemplazado por ADN.
apertura de la horquilla por la helicasa
Desnaturalización del ADN
La doble hélice puede des-espiralizarse in vitro mediante calor, pH extremos y otras condiciones (urea, hidróxido de sodio, etc.) en un proceso denominado fusión (melting). Oscila entre 45 y 70 grados. Se puede calcular su punto de fusión, que es característico y dependiente de la proporción A/T versus G/C, debido al hecho que hay sólo dos puentes de hidrógeno en la unión A/T, y tres en la G/C, unión más estable.
Esta característica será de importancia a la hora de querer separar las cadenas de ADN, esto se logra con calor, sometiendo a la muestra a 90 grados, por ejemplo.
Esta característica será útil a la hora de realizar una PCR, ya que para que se sintetice ADN necesitamos las cadenas separadas para que cada una sirva de molde para sintetizar una nueva y/o para usar una sonda marcada, por ejemplo
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